Introducción

El concepto de calidad de semillas está compuesto por cuatro atributos: genético, físico, sanitario y fisiológico. El primero hace referencia a la precocidad de un cultivar, su potencial de rendimiento, capacidad de enfrentar diferentes tipos de estrés, pureza varietal y calidad de grano, entre otras características. El atributo físico hace referencia a la humedad de la semilla, a los daños mecánicos que se puedan presentar en un lote de semillas, masa, apariencia, presencia de semillas de otros cultivares, de otras especies y/o de material inerte. El tercer atributo de la calidad de la semilla, el componente sanitario, representa la sanidad del lote de semillas, ya que semillas infectadas por microorganismos pueden tener bajo vigor o no ser viables, razón por la cual todas las semillas comercializadas deben tener niveles aceptablemente bajos de cualquier patógeno. Finalmente, el atributo fisiológico, también llamado de calidad fisiológica de la semilla, envuelve el metabolismo de la misma. Este atributo está principalmente representado por la capacidad de germinación, el vigor y la latencia que un lote de semillas puede presentar (^{Peske, Barros y Schuch, 2012}).

El tratamiento químico de semillas de soja es una práctica ampliamente difundida, utilizada en cerca de 95 % de las semillas comercializadas en Brasil. El objetivo de esta práctica es proteger las semillas y plántulas en la fase inicial del crecimiento contra varias adversidades, haciendo uso de productos fitosanitarios como fungicidas e insecticidas (^{Ludwig et al., 2011}; ^{Pereira et al., 2011}).

Según ^{Avelar et al. (2011}) la actividad es económicamente recomendada, siempre que sean usados productos o mezclas de productos adecuados, en la dosis correcta y distribuidos uniformemente en todo el lote de semillas. De la misma forma, de acuerdo con ^{Lucca Filho (2006}), el tratamiento químico para ser eficiente debe ser realizado con un producto capaz de erradicar los patógenos presentes en las semillas, no ser tóxico para las plantas, para el hombre y para el medio ambiente, presentar estabilidad, adherencia y cobertura, no ser corrosivo, y ser de bajo costo y fácil adquisición, además de ser compatible con otros productos.

Conforme aumenta la percepción del valor de la semilla y la importancia de proteger y/o mejorar su desempeño, crece en el mercado la disponibilidad de productos para el tratamiento de semillas con diferentes finalidades, como protección o nutrición (micronutrientes), mejorando su desempeño en los aspectos fisiológicos y económicos (^{Avelar et al., 2011}).

Un gran avance tecnológico ocurrido de manera simultánea con la adopción y el desarrollo del tratamiento industrial de semillas fue el lanzamiento de nuevas moléculas insecticidas y fungicidas, bioactivadores y películas de recubrimiento, que junto a los beneficios sanitarios y fisiológicos, permiten el tratamiento anticipado de las semillas y su almacenamiento por períodos prolongados sin grandes riesgos de pérdidas de calidad fisiológica (^{Piccinin et al., 2013}).

En el tratamiento de semillas de soja, además de la utilización de los productos citados anteriormente, se ha realizado la aplicación de polímeros que forman una película alrededor de las semillas sin modificar su forma o masa, denominado peliculización o «film coating» (^{Taylor, Grabe y Paine, 1997}). Los polímeros utilizados en el tratamiento de semillas pueden aumentar la retención y uniformidad de distribución de fungicidas en la superficie de las mismas (^{Reichenbach, 2004}). El uso de polímeros ayuda adicionalmente a reducir el riesgo de emisión de polvo tóxico al ambiente y mantiene por más tiempo los ingredientes activos adheridos a las semillas, contribuyendo así con una mejor actividad de los productos sobre los organismos deletéreos (^{Nunes y Baudet, 2011}).

El tratamiento de semillas se constituyó en una operación rutinaria. Sin embargo, poco se conoce sobre la influencia de los insecticidas sobre la germinación y el vigor de las semillas de soja (^{Dan et al., 2012}), siendo que algunos insecticidas pueden conferir, además del efecto protector, efectos fisiológicos en el crecimiento inicial y desarrollo de las plantas, influenciando positiva o negativamente.

El almacenamiento de semillas tiene elevada importancia porque generalmente ocurre un intervalo de tiempo entre la cosecha de la semilla y la siembra subsecuente, el cual puede extenderse por meses, dependiendo de la especie, cultivar, lugar de producción, condiciones ambientales predominantes y tecnología de producción. La razón fundamental del almacenamiento está vinculada a la preservación de la calidad fisiológica y sanitaria de las semillas, por la reducción de la contaminación por plagas y de la incidencia de microorganismos y minimización de la tasa de deterioro (^{Villela y Menezes, 2009}).

Algunas empresas realizan la operación de tratamiento de semillas antes del ensaque o en el momento de la entrega. Sin embargo, ^{Menten (1996}) evidenció algunos problemas referentes a la utilización del tratamiento anticipado. Uno de estos posibles inconvenientes puede estar relacionado a efectos fitotóxicos que afectan la calidad de las semillas en el almacenamiento cuando las mismas están tratadas. No obstante, es escasa la información sobre la influencia de los insecticidas sobre la germinación y vigor de las semillas de soja, principalmente durante el almacenamiento.

De acuerdo con lo expuesto, el presente trabajo tuvo como objetivo analizar la calidad fisiológica de semillas durante el almacenamiento después de haber sido tratadas con diferentes mezclas de productos como fungicidas, insecticidas y bioestimulantes.

Materiales y métodos

El experimento fue realizado en el laboratorio de semillas del Seed Care Institute de la empresa Syngenta, ubicado en el municipio de Holambra-SP, en el periodo de enero a junio de 2014 con evaluaciones de 0 a 180 días después del tratamiento. Fue utilizado un lote de semillas de soja, cultivar NK 7059 RR, categoría S1, clasificadas en tamiz de 6,5 mm, con germinación y vigor inicial de 99 y 92 %, respectivamente.

Las semillas fueron tratadas (1 kg para cada unidad experimental) en tratadora «rotostat» modelo Niklas WN5 regulada para operar en rotación de 25 Hz y ciclo de aplicación de 15 segundos (5 s de inyección, 8 s de mezcla y secamiento, 2 s de descarga).

Fueron evaluados 11 tratamientos de semillas combinando diferentes productos y utilizando diferentes volúmenes de preparados, de acuerdo con el Cuadro 1. Después del tratamiento, las semillas fueron almacenadas en cámara fría a una temperatura de 16 ± 2 ºC y los análisis de calidad fisiológica fueron realizados a los 0, 60, 90, 120, 150 y 180 días después.

Para la evaluación de la calidad fisiológica fueron realizados los siguientes análisis:

Resultados y discusión

De manera general, la calidad fisiológica de las semillas, medida a través de los análisis de germinación, envejecimiento acelerado y emergencia a campo, se vio influenciada de forma diferente por cada tratamiento a través del tiempo.

Los resultados del análisis de germinación (Cuadro 2), permitieron observar que después de 180 días de almacenamiento, los tratamientos T1 (testigo); T2, T3 y T4 tuvieron el mayor porcentaje de plántulas normales germinadas, seguidos por los tratamientos T5, T6 y T7 los cuales presentaron calidad intermedia. Los tratamientos T9, T10 y T11 afectaron en mayor medida la calidad fisiológica de las semillas en todas las épocas de evaluación. Esto ocurrió probablemente por la cantidad de agua adicionada a la mezcla de los productos de los tratamientos nueve y diez, y también por causa de la formulación más acuosa de los productos utilizados en el tratamiento T11.

Según ^{Ludwig et al. (2011}) la reducción de la germinación con la aplicación de fungicida y/o insecticida puede estar relacionada con la acción del ingrediente activo sobre las semillas, el cual puede tener un efecto fitotóxico que reduce la germinación de las mismas. En este trabajo, ese efecto no se manifestó antes de 60 días de almacenamiento, resultado que concuerda con el obtenido por ^{Bays et al. (2007}). Sin embargo, estos autores resaltan que los resultados deben ser observados con cautela, pues la utilización de fungicidas es de gran importancia para el establecimiento del cultivo de soja.

La reducción de la germinación también puede estar asociada al alto volumen de preparado usado en algunos tratamientos, como por ejemplo el T10, el cual presentó un menor porcentaje de germinación. Este tratamiento fue el que tuvo el volumen de preparado mayor (1200 mL 100 kg^-1 de semillas), por lo que pudo presentar alta velocidad de imbibición de las semillas.

El tratamiento T11, compuesto por regulador de crecimiento y micronutrientes, también presentó bajo porcentaje de germinación, probablemente debido a la ausencia de tratamiento fungicida, el cual estaría protegiendo las semillas contra el crecimiento de hongos de almacenamiento.

Desde el punto de vista comercial, la legislación exige que semillas de soja de las categorías S1, S2, C1 y C2 sean comercializadas con germinación mínima de 80 % (^{Brasil, 2009}). Todas las mezclas de productos utilizadas en este trabajo pueden ser usadas en el tratamiento de semillas, pues las medias de germinación más bajas estuvieron próximas a 85 %, incluso después de 180 días de almacenamiento.

Para evaluar la tendencia del desempeño de la germinación de semillas bajo los diferentes tratamientos y tiempos de evaluación, se ajustaron ecuaciones de regresión (Figura 1). Fue posible verificar que el porcentaje de plántulas normales en el análisis de germinación en función de las épocas de almacenamiento se ajustó a un modelo linear para todos los tratamientos con excepción del T2.

En la Figura 2 es posible observar que los tratamientos T9 y T11 presentaron tendencia de crecimiento en el porcentaje de germinación a medida que aumentaron los periodos de almacenamiento.

En el Cuadro 3 se presentan los resultados del análisis de envejecimiento acelerado. En el periodo inicial (cero días de almacenamiento) los mejores tratamientos fueron T1, T2, T3 y T4. Estos tratamientos prácticamente mantuvieron los resultados durante todo el periodo de almacenamiento. Un comportamiento distinto fue observado en los tratamientos T8, T9, T10 y T11, ya que el porcentaje de plántulas normales obtenidas de semillas envejecidas disminuyó con el avance del tiempo de almacenamiento.

De acuerdo con los resultados presentados en la Figura 3, los tratamientos T8 y T10 fueron inferiores a los demás. Esa reducción en la calidad puede ser atribuida al alto volumen de preparado usado en los tratamientos. El tratamiento T11 también fue afectado, siendo ese resultado atribuido a la ausencia de productos químicos (insecticida y fungicida), favoreciendo la proliferación de patógenos que pueden afectar directamente la calidad de las semillas.

Los demás tratamientos (T1, T2, T3, T4, T5, T6 y T7) presentaron en media una disminución de dos puntos porcentuales a lo largo del almacenamiento. ^{Pereira et al. (2009}) observaron que el tratamiento de semillas de soja con diferentes fungicidas, incluyendo fludioxonil, no interfirió con la germinación, envejecimiento acelerado o emergencia de semillas.

En el test de emergencia a campo (Cuadro 4) fue posible verificar que los tratamientos T1, T2, T3, T4, T5 y T6 tuvieron excelente desarrollo en campo sin mostrar variaciones a través del tiempo de almacenamiento. Este resultado puede ser atribuido al hecho de que las semillas de estos tratamientos fueron tratadas con volúmenes de preparado inferiores a 1000 mL 100 kg^-1 de semillas, de acuerdo con la recomendación de la Embrapa ^{(«Tecnologias de produção de soja», 2014}). En contraparte, los tratamientos T8 y T10 presentaron resultados de emergencia a campo inferiores a 90 %, lo que probablemente se debe al volumen de preparado usado (1200 mL 100 kg^-1 de semillas), el cual puede haber afectado la calidad fisiológica de las semillas en las primeras épocas de evaluación, debido al daño causado por imbibición. Este resultado es diferente al encontrado por ^{Segalin et al. (2013}), quienes trabajando con dos cultivares de semillas de soja en campo y laboratorio, encontraron que volúmenes de preparado de hasta 1400 mL 100 kg^-1 de semillas no afectaron la calidad fisiológica de las mismas.

El T11 también presentó bajo porcentaje de emergencia. Este resultado pudo haber sido influenciado por la presencia de patógenos en el suelo, ya que las semillas no estaban tratadas con fungicidas. ^{Krohn y Malavasi (2004}), evaluando el efecto de fungicidas antes del almacenamiento de semillas de soja, no observaron disminución de la germinación, pero sí observaron reducción de la emergencia a campo cuando las semillas se almacenaron por más de cuatro meses después de tratamiento.

Los resultados de la emergencia a campo durante los periodos de almacenamiento (Figuras 5 y 6) se ajustaron predominantemente a modelos de regresión cuadráticos. Los tratamientos T8 y T10 (Figura 6) fueron los que presentaron mayor reducción durante el periodo de almacenamiento. El tratamiento T11 mostró emergencia por debajo de 80 % en las épocas de 150 y 180 días después del tratamiento.

Los resultados observados en este experimento, positivos en lo que se refiere a los tratamiento usados, difieren de los obtenidos por ^{Dan et al. (2010}) que, evaluando el efecto del tratamiento de semillas con insecticidas sobre la calidad fisiológica de semillas de soja en el almacenamiento, verificaron perjuicios a las semillas, sugiriendo que el tratamiento debe ser realizado próximo a la siembra.

Un hecho que puede justificar los resultados positivos en algunos tratamientos aquí evidenciados, es que algunas mezclas evaluadas contenían regulador de crecimiento y micronutrientes (Co y Mo). Se enfatiza que el efecto positivo de estas moléculas en el tratamiento de semillas de soja ha sido observado en el estudio de ^{Klahold et al. (2006}), y también evidenciado por ^{Guerra et al. (2006}) quienes concluyeron que Co y Mo, aplicados vía tratamiento de semillas de soja, incrementan la germinación y emergencia en campo de las semillas tratadas y también de las semillas producidas en la siguiente generación.

Actualmente, buena parte de las empresas productoras de semillas concentra la operación de tratamiento en algunas semanas antes de la comercialización, por temer efectos negativos de los productos sobre la calidad fisiológica de las semillas durante el almacenamiento, y para garantizar el efecto de estos tratamientos sobre el control de los organismos a los cuales se destinan. Sería ventajoso para la logística de estas empresas si esta operación se pudiera realizar anticipadamente. Sin embargo, es necesario conocer el efecto de los productos utilizados sobre la calidad fisiológica de semillas en el transcurso del periodo de almacenamiento (^{Dan et al., 2010}).

Los resultados obtenidos en este trabajo permitieron observar que el tratamiento de semillas con volúmenes de preparados mayores a 750 mL 100 kg^-1 de semillas pueden afectar la calidad fisiológica de las mismas. Igualmente se observó que el porcentaje de germinación fue superior a 80 %, en su mayoría, comprobando que es posible realizar tratamiento de semillas, con las diferentes mezclas evaluadas, y almacenarlas por hasta 180 días desde que se considere el volumen del preparado utilizado en el tratamiento.